做试管婴儿,女方需要提供高质量的卵子,男方则要奉献优质的精子,方符合“门当户对”的条件,成就一段佳缘。今天就给大家介绍一下实验室的月老们用哪些方法筛选“男神”。
选“男神”的方法,即精液优化处理技术,它能够将精液中非精子成分(大量精浆、上皮细胞、白细胞和细菌等),以及一些大头小尾、死亡、活动不佳的低质量“渣男”进行有效剔除, 选出埋没在芸芸众生“长得帅、跑得快”的男神精子,为体外授精中精子获能奠定基础。
筛选的方法有四种,它们有各自的优缺点:
1、上游法:一种常用于精液质量较好的优化方法。将液化好的精液置于离心管底部,上方缓缓加入适量的人输卵管培养液,离心管倾斜45°置于37°C 、5%C02培养箱。一段时间后,游动能力强的精子便会聚集到液面上方,死的、老弱病残的精子就留在底部。
优点:对精子损伤小,能够得到较高活力的精子;操作简便,成本较低。
缺点:上游时间较长,回收率相对较低;无法处理液化不良的精液,对少弱精患者的精液,上游的精子可能不够多。
2、密度梯度离心法:根据好精子的密度高于死的、差的精子的特性,通过不同密度梯度液,离心后,好精子便留在离心管底部,如图。
优点:操作简便,处理时间短,实用性高,成本较低。
缺点:样本多次转移、离心,对精子有一定损伤。
3、微流控芯片法:目前已经开发了多种芯片,大多是根据精子具有贴壁、趋流游动的特性,从而达到浓缩和筛选优质精子的目的。制作材料一般为聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA),可以根据要求,灵活设计微管道的形状和尺寸。
(几种芯片,图片来源于《SLAS Technology》)
优点:操作标准化、自动化,对精子损伤小,能够很好的筛选出高活力、形态正常的精子。
缺点:优选后的精子浓度低,可能是因为各种管道对精子要求高,不适用于质量较差精液,尤其是对少精子症患者,所以临床上还没有广泛应用。
4、透明带结合法:采用失去受精潜能的不成熟卵子去筛选高质量的精子,精子和卵透明带结合后,并不立即钻入透明带,而是被能动地粘在透明带的表面上。
优点:尽可能模拟自然选择的过程,能够客观的选择具有一定受精能力的精子。
缺点:只适合采用第二代试管技术(ICSI)的精子。
上述四种方法各有优缺点,为了能扬长补短,选出内外兼修的“男神”,提高佳缘成功率,我们中心采用的是密度梯度离心法结合上游法进行筛选。即先将精子进行密度梯度离心,再进行上游,就是笔试海选后又进行了体能复试,这样筛选出来的精子不仅活力高、受到损伤小,还能够更好地剔除杂质成分的影响,减少其对精子功能的影响,对提高精子存活率、DNA完整性具有较好作用。